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拓展液相色譜溶劑效應:解析色譜峰異常并尋找解決辦法

更新時間:2023-07-17      點擊次數(shù):1658

液相色譜的溶劑效應是指樣品在溶解時與稀釋劑、流動相之間的相互作用,導致色譜行為異常的現(xiàn)象。傳統(tǒng)理解中,溶劑效應通常用來解釋樣品在流動相中的溶解度大于在純樣品溶劑中時所造成的色譜峰變形。例如,當用100%純乙腈溶解樣品,并注入乙腈—水(18:82)的反相色譜系統(tǒng)中,會觀察到峰分叉或拖尾現(xiàn)象。

然而,這種傳統(tǒng)的理解并不能完整解釋其他由所選稀釋劑導致的色譜峰變形現(xiàn)象,比如樣品在pH 6.8溶出介質中取出后,注入某些緩沖鹽—有機相系統(tǒng)中保留時間不穩(wěn)定及色譜峰變形的情況。

為了更全面理解和解釋這些現(xiàn)象,我們需要擴展溶劑效應的概念。具體的擴展內容如下:

1. 洗脫能力的差異:這是目前一般理解的溶劑效應,指的是樣品在稀釋劑與流動相之間洗脫行為的差異。

2. 電離狀態(tài)的差異:某些藥物活性成分具有離子化的特性,例如成鹽狀態(tài)的藥物如鹽酸達卡他韋、帕瑞昔布鈉等。這些樣品既存在離子化狀態(tài)也存在非離子化狀態(tài),并且在流動相和固定相之間的分配系數(shù)不同。在反相系統(tǒng)中,非離子化狀態(tài)更容易與固定相結合,因此保留時間較長,而離子化狀態(tài)則更親和于流動相,導致保留較弱。如果樣品在稀釋劑中的電離狀態(tài)與流動相的電離狀態(tài)存在顯著差異,就可能出現(xiàn)保留時間不穩(wěn)定及色譜峰變形的現(xiàn)象。為解決這個問題,可以嘗試使用流動相稀釋樣品溶液、減少進樣量或增加流動相的緩沖能力。

3. 溶解性的差異:在與參比制劑的溶出曲線對比試驗中,經(jīng)常會在溶出介質中加入表面活性劑。這時,有時會觀察到樣品的保留時間不穩(wěn)定。這也是由于樣品在稀釋劑中與固定相的分配系數(shù)與流動相與固定相的分配系數(shù)差異較大導致的。解決辦法可以是在流動相中加入相同的表面活性劑,或調整有機相的比例。

溶劑效應的理解可以擴展為樣品中某些組分在稀釋劑與流動相之間的狀態(tài)差異導致的色譜行為異常。為解決這類問題,可以采取稀釋樣品溶液的流動相、減少進樣量或增加流動相緩沖能力等方法。雖然液相色譜中可能還存在其他差異,但由于篇幅限制,未一一列舉??傊?,可以參照上述情況進行解釋并尋找解決辦法。


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